تثبیت آنزیم اوره‌آز روی نانو بیوفیبریل‌های آمیلوئیدی حاصل از آلبومین سرم گاوی

Authors

  • امیر آراسته استادیار، گروه زیست‌شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد رشت، رشت، ایران
  • حبیب‌اله ناظم استاد، گروه زیست‌شناسی، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران
  • ذوالفقار لطفی دانشجوی دکتری، گروه زیست‌شناسی، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران
  • محمد فضیلتی استاد، گروه زیست‌شناسی، دانشگاه پیام نور، تهران، ایر
Abstract:

چکیده آنزیم اوره­آز (EC.3.5.1.5) از دسته هیدرولاز­ها است که هیدرولیز اوره را به آمونیاک و دی اکسیدکربن کاتالیز می­کند. این آنزیم کاربردهای مختلفی در متابولیسم نیتروژن، تهیه واکسن، کیت­های تشخیص اوره، صنایع نوشابه­سازی و غیره دارد. در این تحقیق از نانورشته­های آمیلوئیدی حاصل از آلبومین سرم گاوی به­عنوان بستری جدید برای تثبیت آنزیم اوره­آز استفاده شد. تولید نانو رشته‌های آمیلوئیدی با سه تکنیک طیف­سنجی کنگورد، اسپکتروفلوریمتری و اسپکتروپلاریمتری بهینه­سازی شده و رشته‌های حاصله با تصاویر میکروسکوپ الکترونی مورد تأیید قرار گرفتند. سپس آنزیم اوره­آز با استفاده از مولکول­های گلوتارآلدهید و با ایجاد پل­های عرضی روی رشته­های آمیلوئیدی تثبیت‌شده و فاکتورهای سینتیکی آن با آنزیم آزاد مقایسه شدند. بیشترین میزان تولید رشته­های آمیلوئیدی پس از 48 ساعت انکوباسیون آلبومین سرم گاوی با غلظت 10 میلی­گرم بر میلی­لیتر و دمای 70 درجه سانتی‌گراد در بافر سیترات-فسفات با pH برابر 4 به­دست آمد. آنزیم تثبیت­شده نسبت به شکل آزاد دارای قابلیت نگه­داری و پایداری بیشتری بود و فعالیت ویژه بالاتر و نیز Km کوچکتری را نشان داد. دمای بهینه از 40 به 70 درجه سانتی­گراد و pH بهینه نیز از 6 تا 7 به 6 تا 9 در آنزیم تثبیت­شده بهبود یافت. بنابراین رشته‌های آمیلوئیدی با داشتن گروه­های شیمیایی مختلف، برای تثبیت آنزیم اوره­آز مناسب بوده­اند. بهبود ویژگی‌های سینتیکی و پایداری آنزیم اوره­آز در اثر تثبیت بر رشته­های آمیلوئیدی امکان استفاده گسترده­تر از این آنزیم را در صنایع مرتبط فراهم می­آورد.  

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

القای فیبریل‌زایی در سرم آلبومین گاوی و تولید رشته‌های آمیلوئیدی به منظور استفاده از آنها به‌عنوان نانو ماده زیستی جدید

چکیده رشته­های آمیلوئیدی دسته­ای از نانو رشته­های پروتئینی هستند که در آن پروتئین طبیعی به رشته­های متراکم تبدیل شده­اند. تجمع می­تواند بیماریزا و یا غیر­بیماریزا باشد. اخیرا این رشته­ها با توجه به ساختار منحصر به فردی که دارند، برای تولید نانومواد زیستی مورد توجه قرار گرفته­اند. در این مطالعه از آلبومین سرم گاوی به‌عنوان یک پروتئین مدل برای بهینه‌سازی فرایند فیبریل زایی استفاده شد. غلظت­های 2-...

full text

استفاده از نانو رشته‌های آمیلوئیدی به‌عنوان یک بستر پروتئینی برای تثبیت آنزیم لیپاز باکتری سودوموناس سپاسیا

چکیده آمیلوئیدها در ­شرایط غیرطبیعی­کننده از پروتئین­های مختلف به­ وجود می­آیند. سطح بسیار فعال، این مواد را به­عنوان بستری برای تثبیت آنزیم مناسب می­سازد. هدف از ­این مطالعه تولید رشته­های آمیلوئیدی و بررسی امکان استفاده از آن­ها به­عنوان بستر برای تثبیت آنزیم بوده است. برای تولید حداکثر میزان آمیلوئید از روش پاسخ سطح1 استفاده شد و نتایج طیف­ سنجی کنگورد و دورنگ­نمایی دورانی2 با نرم­افزار Des...

full text

بررسی مشخصات و ساختار نانوسامانۀ سرم آلبومین گاوی-رسوراترول

حل‌‎شوندگی کم رسوراترول در آب و حساس‌بودن این ترکیب به اکسیداسیون و ایزومریزاسیون، کاربرد آن را در فرمولاسیون مواد غذایی محدود می‌کند. در این مطالعه تأثیر برهمکنش آلبومین ـ رسوراترول بر اندازه و بار سامانه، حل‌شوندگی و خاصیت آنتی‌اکسیدانی رسوراترول مورد بررسی قرار گرفت. اندازه و بار ذرات با دستگاه پراکنش نور لیزر، مورفولوژی ذرات به کمک میکروسکوپ الکترونی، تأثیر تشکیل کمپلکس بر حل‌شوندگی رسوراتر...

full text

بررسی نانوکمپلکس آلبومین سرم گاوی-کورکومین به روش طیف‌سنجی فلوئورتابی

یکی از مهم‌ترین عملکردهای زیستی آلبومین، توانایی پیوند با ترکیبات زیست‌فعال طبیعی و سنتزی است. لذا آلبومین به‌عنوان حامل، برای پیوند با موادی مانند ترکیبات گیاهی با ویژگی‌های درمانی و دارویی گزینه مناسبی به نظر می‌رسد. از سوی دیگر پیشرفت‌های اخیر در زمینه علم نانو و انتقال غذا داروها، مستلزم پژوهش‌های گسترده در زمینه تهیه و بررسی ساختار نانوکمپلکس مواد زیست فعال است. در این مطالعه، برهم‌کنش آلب...

full text

تثبیت آنزیم گلوکز اکسیداز بر روی نانو ساختارگرافن جهت استفاده در بیوسنسور قند خون

  سابقه و هدف: در این مقاله ابتدا به مفهوم تثبیت آنزیم و روشهای تثبیت پرداخته. در ادامه با مطالعه موردی تثبیت آنزیم گلوکز اکسیداز بر روی پایه ‌ های گرافنی به تشریح روشهای رایج در شناسایی گلوکز پرداخته می ‌ شود.آنزیم گلوکز اکسیداز یک بیوکاتالیست زیستی است که فرآیند تبدیل گلوکز به آب اکسیژنه را تسریع می ‌ کند. اکثر دستگاه ‌ های رایج اندازه گیری قند خون موجود در بازار بر همین اساس فعالیت می ‌ کنند...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 6  issue 3

pages  1- 15

publication date 2018-02-20

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023